常用蛋白裂解液成分尿素：常用浓度8M

r 硫脲：常用浓度2M

r DTT：作为还原剂，打开肽链之间的二硫键

r 去污剂：SDS, NP-40, TritonX-100, CHAPS

r 抑制蛋白酶活性的方法细胞裂解后释放蛋白酶，需要抑制其活性，方法有：

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加入强变性剂

低温

调节pH，pH>9时很多蛋白酶失活，但要注意目的蛋白是否也失活

加入蛋白酶抑制剂，如PMSF

蛋白质质谱检测流程

r 蛋白质提取——>浓度测定——>蛋白质分级分离（SDS PAGE等）——>脱盐，富集——>还原，烷基化——>酶切——>脱盐/标记——>肽段分级分离——>质谱检测

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