人猿分界的重要标志是直立行走。

直立行走是进化发展的基础，是人类脱离森林束缚，开拓新家园的标志，是使用工具、制造工具的基础。恩格斯曾指出，直立行走是从猿到人转变过程中具有决定意义的一步。