达.芬奇创作此画时,在艺术上可谓孜孜以求,他把自己对人像典型的审美理想全部倾注于此,画中人物坐姿优雅,笑容微妙,背景山水幽深茫茫,可以说是淋漓尽致地发挥了他那奇特的烟雾状笔法。
而且,他力图使人物的丰富内心感情和美丽的外形达到巧妙的结合,他对于人像面容中眼角唇边等表露感情的关键部位,也特别着重掌握精确与含蓄的辩证关系,达到神韵之境,从而使蒙娜丽莎的微笑含义无穷,具有一种神秘莫测的千古奇韵,那如梦似纪的妩媚微笑,则使观者如坠云雾,直叹妙不可言;这种致于完美的生动人像实为人文主义关于人的崇高理想的光辉的体现。
蒙娜丽莎是欧洲文艺复兴时期重要的代表作品,欧洲文艺复兴的主要思潮和文艺理论就是人文主义,人文主义反对一切,以神为本的旧观念,以人权对抗神权,从而使文艺作品,从以人为描述对象转变为以人为描述表达的表现,达芬奇的《蒙娜丽莎》创造了人物肖像的典型形象,这种以歌颂人为主题的肖像画,一反过去宗教内容绘画的传统,是对欧洲中世纪压抑人性的神学和禁欲主义的一种反叛,也是一种精神革命的开始。
新观念使得该画成为文艺复兴时期人文主义的旗帜,有人说“一个女子的微笑,唤起欧洲人性的觉醒。"