人猿分界的标志是两足直立行走。

直立行走是进化发展的基础，是人类脱离森林束缚，开拓新家园的标志，是使用工具、制造工具的基础。恩格斯曾指出，直立行走是从猿到人转变过程中具有决定意义的一步。古猿的直立行走造成了前后肢的分工，直立行走使古人类能够将前肢解放出来，使用工具。前肢所从事的活动越来越多，上肢更加灵巧。