km是由酶和底物的相互关系所决定的，它可以用来判断酶的最适底物。

km值等于酶促反应速度达到最大反应速度一半时所对应的底物浓度，是酶的特征常数之一。不同的酶km值不同，同一种酶与不同底物反应km值也不同，km值可近似的反应酶与底物的亲和力大小：km值大，表明亲和力小；km值小，表明亲合力大。