赤井秀一知道世良真纯是他妹妹。

虽然赤井秀一常年没有和家人在一起，但是在世良真纯小的时候就已经知道并且见过面了，而且知道妹妹的名字叫做世良真纯。后来在列车篇的时候，世良真纯昏过去的时候口中无意识的喃喃到秀哥的时候，被正在抱着她的化妆后的赤井秀一听到，赤井秀一笑了一下。种种迹象都说明，赤井秀一一直就知道自己有个妹妹叫世良真纯，而且确切的知道她的长相。

当然知道啊，动画中有剧情：4年前，与波本（即安室透）、苏格兰威士忌（即诸伏景光）一起行动时遇到了妹妹世良真纯，为她买了回家的车票。