Southern blot 是一种常用的 DNA 定量的。其原理是将待测的 DNA 样品固定在固相载体(硝酸纤维膜或尼龙膜)上,与标记的核酸探针进行杂交,在与探针有同源序列的固相 DNA 的位置上显示出杂交信号,通过检测信号的有无、强弱可以对样品定性、定量,从而计算出转入的拷贝数。
Southern 法准确性高、特异性强,但存在费时费力的缺点。
另外,由于 Southern 法检测不经过靶片段的扩增( PCR ),一般每个电泳通道需要 10-30 μ g 的 DNA ,在实际操作中就需要较大量的植物材料来提取 DNA ,而转基因植物的愈伤组织在无菌条件下经过筛选、重新分化后一般都比较细弱,不宜大量取样。
如果,造成限制性酶切位点丢失, Southern 法也到。这些因素都制约了 Southern 法在 T 0 代转基因植物中。
Southern blot技术是一种分子生物学技术,主要用于分析DNA序列。它通过将DNA进行限制性酶切割并电泳分离,然后转移到膜上进行杂交,最后通过放射性探针检测目标DNA片段的存在与否。pct产物分析利用Southern blot技术,通过将DNA转移到膜上并使用感兴趣的探针进行杂交,来检测特定的DNA序列。这种方法可用于病原体的检测和诊断等方面。