反向遗传学（Reverse genetics）是相对正向遗传学而言的，是在基因序列已知的基础上分析研究基因的功能。

目前反向遗传学的基本思路是通过获得功能丧失(loss-of-function)的突变体来研究突变所造成的表型效应，从而推测该基因在生物体内的作用。