瑞特染液怎么

2024-12-05 00:30:17
泛心理精选
泛心理精选认证

泛心理精选为您分享以下优质知识

瑞特染液是一种常用的细胞染色剂,用于血细胞和疟原虫染色。以下是瑞特染液的基本配制和使用方法:

配制瑞特染液

材料准备

瑞氏染料(亚甲蓝和伊红)

甲醇(AR)

甘油(可选)

步骤

将干燥的瑞氏染料放入乳钵中,轻轻敲碎成粉末状。

加入少量甘油或甲醇研磨,直至染料在乳缸内呈现“一面镜”光泽,无染料粉粒沉着。

再加入较多量甲醇继续研磨,直至乳钵内染料及甲醇用完为止。

将上层液体倒入清洁储存瓶中,并重复上述步骤,直至染料完全转移至储存瓶。

摇匀后密封瓶口,室温下避光保存,储存时间越长,染料溶解和分解越好,一般建议储存3个月以上。

使用瑞特染液

固定细胞

将血膜固定在载玻片上。

染色过程

加瑞特染液,静置一段时间(通常为几分钟至十几分钟)。

加等量缓冲液冲洗,待干。

注意事项

新鲜配制的瑞特染色剂偏碱性,需在室温或37℃下贮存一定时间,待美蓝逐渐转变为天青B后才能使用。

染色对氢离子浓度敏感,pH值的改变可影响染色效果。

使用优质甲醇,稀释染色时需用缓冲液,冲洗用水应接近中性。

结果解释

血红蛋白、嗜酸性颗粒等阳离子物质与伊红结合,染成橘红色。

核蛋白、嗜碱性颗粒等阴离子物质与亚甲蓝结合,染成蓝灰色。

中性颗粒与伊红和亚甲蓝均可结合,染成淡紫色。

储存与成熟

贮存时必须塞严,防止甲醇挥发和氧化。

加入甘油可防止甲醇挥发,同时使血细胞染色更清晰。

以上是瑞特染液的基本配制和使用方法。