抗生素效价的估计通常采用生物学方法，因为这些方法能够直接反映抗生素的杀菌能力，并且与临床使用的要求相一致。以下是几种常用的生物学方法：

稀释法

将抗生素样品稀释成不同的浓度。

将这些稀释液分别加入含有试验菌种的培养基中。

观察在特定条件下（如37℃保温箱内培养一定时间）哪些稀释度能抑制细菌生长。

该稀释度即为效价测定的终点。

比浊法

与稀释法类似，将不同量的检品和标准品加入培养基中。

观察其对试验菌种的效应，即细菌生长引起的混浊度。

通过比较标准品浓度和细菌生长引起的混浊度，推算检品的效价。

扩散法（渗透法）

在琼脂平板上放置含有抗生素的小钢管。

管内放入标准品和检品的溶液。

经过一段时间的恒温培育后，观察抑菌圈的大小。

抑菌圈的大小与抗生素的总量对数值成线性关系，通过比较标准品和检品的抑菌圈大小来计算效价。

管碟法

在含有高度敏感性试验菌的琼脂平板上放置小钢管。

管内放入标准品和检品的溶液。

经过一段时间的恒温培育后，通过比较标准品和检品的抑菌圈大小来测定效价。

这些方法中，管碟法是一种国际通用的方法，并且已经列入药典。通过这些方法，可以较为准确地估计抗生素的效价。需要注意的是，所有操作过程必须严格无菌，以保证结果的准确性